Preparación de frotis y técnica de tinción.
a. obtener una muestra de piel con una hoja de bisturí, para raspar escamas de la lesión de la piel, trasladar la parte superior de una vesícula o colocar una única gota de secreción vaginal en un portaobjetos de vidrio.
b. colocar una o dos gotas de hidróxido de potasio (KOH) (15%) sobre la muestra (raspado de piel o secreción vaginal) en el portaobjetos. Poner un cubreobjetos sobre el área que va a examinarse.
c. permitir que la preparación de KOH se asiente a temperatura ambiente hasta que el material se haya aclarado. Debe calentarse el portaobjetos para acelerar el proceso de aclaramiento.
Nota: el olor a pescado de la amina tras la adición del KOH a una secreción vaginal es típico de una vaginosis bacteriana causada por Gardenella vaginalis.
Examen microscópico
a. examinar el frotis bajo lentes de baja potencia (10X) y alto poder en seco (40X) para hallar formas miceliales. Las hifas septadas y ramificadas son típicas de la dermatofitosis (p. ej., tritrichophyton, epidermophyton, especies de microsporum); seudohifas septadas ramificadas, levaduriformes o no, se ven en la cadidosis (especies de candida), e hifas cortas y curvas mas grumos de esporas (“espaguetis y albóndigas”) se ven en la tiña versicolor (Malassezia furfur).
b. registrar y reportar todas las levaduras, seudohifas o hifas, indicando los brotes y la tabicación.