PRIMERA PARTE
SEGUNDA PARTE
Este Blog se realiza con la finalidad de apoyar a los profesionales que laboran en laboratorios clínicos y bancos de sangre
lunes, 22 de mayo de 2017
sábado, 20 de mayo de 2017
Medio LIA
Este ensayo permite diferenciar los microorganismos que producen descarboxilación o desaminación de la lisina.
Se puede detectar además la producción de H2S.
Es muy utilizado en las técnicas de búsqueda de Salmonella, principalmente para descartar otras bacterias que dan colonias de aspecto similar en los medios diferenciales utilizados durante el aislamiento selectivo.
Durante las primeras etapas de la incubación el fondo virará el indicador de pH del medio al ácido (amarillo) por la fermentación de glucosa.
Luego, si el aminoácido es descarboxilado se formarán aminas que provocan un retorno al color original del medio o hacia un viraje al básico (color violeta).
En la desaminación se produce un ácido carboxílico y NH3 y se visualiza en la superficie la aparición de un color rojo intenso.
La producción de H2S a partir de tiosulfato se visualiza por la precipitación de sulfuro ferroso de color negro.
viernes, 19 de mayo de 2017
Citrato de Simmons
Para la identificación de bacterias, principalmente Enterobacterias basándose en la utilización del citrato, como única fuente de carbono.
El citrato de sodio es la única fuente de carbono.
El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico del medio.
Cuando las bacterias utilizan el citrato, el medio se alcaliniza y cambia el color inicial verde (neutro), que esta dado por la presencia del azul de bromotimol a color azul (alcalino, prueba positiva).
La reacción negativa se manifiesta por ausencia de crecimiento y no hay cambio de color
Salmonella typhi, Salmonella paratyphi y Shigella se pueden diferenciar de Salmonella schottmuelleri, Salmonella enteritidis y Salmonella typhimurium siendo este ultimo capaz de utilizar el citrato, mientras que el primero no puede hacerlo.
El medio se puede emplear de la misma forma que el citrato de Koser para realizar la prueba de utilización del citrato como una de las reacciones del IMVIC.
domingo, 14 de mayo de 2017
sábado, 13 de mayo de 2017
Muestra de orina
Instrucciones para el paciente
Para paciente masculino:
Para paciente femenino:
• Lave sus manos con agua y jabón antes de obtener la muestra
• Separe sus labios
• Limpie sus genitales externos, de adelante hacia atrás, con tres toallas húmedas
• Seque con una toalla seca
• Deje salir un primer chorro a la taza del baño
• Deposite la siguiente porción en el frasco
• Elimine el resto en la taza del baño
• Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo antes posible
Para paciente masculino:
• Lave sus manos con agua y jabón antes de obtener la muestra
• Retraiga la piel del pene y lave la salida de la uretra con una toalla mojada (con pura agua)
• Limpie y seque con una toalla seca
• Deje salir un primer chorro a la taza del baño
• Deposite la siguiente porción en el frasco
• Elimine el resto en la taza del baño
• Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo antes posible
Para paciente femenino:
• Lave sus manos con agua y jabón antes de obtener la muestra
• Separe sus labios
• Limpie sus genitales externos, de adelante hacia atrás, con tres toallas húmedas
• Seque con una toalla seca
• Deje salir un primer chorro a la taza del baño
• Deposite la siguiente porción en el frasco
• Elimine el resto en la taza del baño
• Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo antes posible
Guía práctica
para la estandarización del procesamiento y examen de las muestras de orina.Por: M. en C. Vicente de Mária
y Campos Otegui. BIO-RAD.
Sistema Kova
Sistema Kova para estandarización de la cuenta microscópica de partículas en el sedimento urinario.
Es un equipo de material plástico desechable y estandarizado para controlar el volumen en el tubo, resuspender el sedimento en un volumen fijo y contar las partículas microscópicas en una cámara de cuenta estandarizada.
Guía práctica para la estandarización del procesamiento y examen de las muestras de orina.Por: M. en C. Vicente de Mária y Campos Otegui. BIO-RAD.
domingo, 7 de mayo de 2017
Tira reactiva
La tira reactiva utilizada para la determinación del pH y densidad y la investigación de elementos químicos en el examen de orina de rutina es constituida por un soporte plástico conteniendo áreas impregnadas con reactivos químicos.
Se produce una reacción de color cuando las área de química seca entran en contacto con la orina.
sábado, 6 de mayo de 2017
Fasciola hepática
Parásito cuyo hospedero definitivo es el ganado vacuno; sin embargo, en algunas ocasiones, el parásito adulto puede habitar el hígado del humano donde pone sus huevos que salen por los conductos biliares y se excretan con la materia fecal.
Huevo. Solución salina. Es grande de forma elíptica, operculado* y de color pardo amarillento, mide de 130 a 140 μm de largo por 63 a 90 μm de ancho y está cubierto por una membrana gruesa y definida.
En su interior se observa una masa granulosa y el embrión no se observa porque a la materia fecal llega el huevo sin madurar.
Tinción con lugol. Tiene las mismas características descritas para solución salina, pero con lugol se tiñe tan intensamente que es difícil hacer el diagnóstico.
*opérculo. Cubierta o tapa de los huevos de algunos platelmintos.
Atlas de Parasitología - M. Montoya et al. - 1º (2011)
viernes, 5 de mayo de 2017
Desviaciones
Cuando en la medición de leucocitos se ven células jóvenes aparecen los neutrófilos en forma de núcleo en forma de bastón (cayados), y un aumento del porcentaje de los glóbulos blancos polimorfonucleares. esto se denomina como "desviación a la izquierda". Este término sugiere infecciones bacterianas agudas.
La "desviación a la derecha" se dice cuando el porcentaje de linfocitos y monocitos se encuentra aumentado con respecto al de los polimorfonucleares (neutrófilos, eosinófilos y basófilos), se asocia en general a enfermedades víricas.
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miércoles, 3 de mayo de 2017
Autoclave
Manejo del autoclave
a) Debe haber suficiente agua destilada en el fondo del autoclave
b) Colocar el material convenientemente tapado (algodón hidrófobo, gasa, papel craft) en un cesto metálico
c) Cerrar herméticamente la tapa
d) Encender el sistema calórico y abrir la llave de escape para eliminar el aire (que es desplazado por el propio vapor), ya que si éste permanece en el interior alterará la relación temperatura – presión
e) Asegurarse que salga todo el aire residual (hasta que comience a salir vapor de agua)
f) Inmediatamente cerrar la llave de escape de vapor
g) Comienza a acumularse el vapor (indicado en el manómetro) y a aumentar la temperatura
h) Cuando se llegue a la temperatura y presión deseada (121°C), se debe regular el gas para mantener estos valores constantes. Si es una autoclave eléctrica se regula automáticamente mediante un termorregulador
i) Transcurrido el tiempo necesario (15 a 20 minutos) se corta la fuente calórica
j) La llave de escape de vapor se abre ligeramente para evacuar lentamente el vapor del autoclave
k) Cuando la presión marque cero, se puede abrir el autoclave y retirar el material para evitar un sobrecalentamiento
Precauciones en el uso del Autoclave:
a) El autoclave se debe cargar distribuyendo en material en forma homogénea, evitando la formación de bolsas de vacío
b) Evitar sobrecargar el autoclave, ya que impide la circulación homogénea del vapor
c) La causa más frecuente de fallas de esterilización es la evacuación incompleta del aire, lo que no permite que la temperatura alcance el nivel deseado aún cuando la presión si lo haga. De ahí la importancia que el equipo tenga ambos marcadores
d) Si se utiliza material con tapas roscas, éstas no deben estar completamente cerradas para permitir la entrada del vapor.
Esterilización
Se define como la destrucción completa o eliminación total de los microorganismos patógenos y saprófitos que se encuentran en el interior o en la superficie de objetos y sustancias.
El criterio práctico de la esterilidad es la ausencia de crecimiento microbiano en un medio adecuado.
La eliminación de los microorganismos puede efectuarse mediante procesos físicos, mecánicos o químicos.
Los métodos físicos y mecánicos se incluyen en el término esterilización y los métodos químicos en el concepto de desinfección.
El método escogido para esterilizar un producto depende fundamentalmente de su naturaleza y estabilidad frente al calor u otros agentes esterilizantes.
Así por ejemplo, cuando se necesite agregar suero equino a un medio de cultivo líquido, para enriquecerlo, no se puede aplicar calor para esterilizarlo, ya que se produciría la coagulación de las proteínas del suero alterando su composición.
Situación semejante ocurre con otras sustancias o materiales termolábiles, para los cuales se utilizan métodos de esterilización que no alteren su estabilidad, uniformidad o identidad de dichas sustancias o materiales.
https://es.wikibooks.org/wiki/Microbiolog%C3%ADa/Esterilizaci%C3%B3n
Imagen.https://es.slideshare.net/Tatiitacegu/desinfeccion-y-esterilizacion-preventiva
martes, 2 de mayo de 2017
Prueba de Coombs
La prueba de Coombs sirve para detectar la existencia de anticuerpos frente a algún antígeno eritrocitario mediante la adición de suero antiglobulina humana o anticomplemento.
Coombs directa
La prueba de Coombs directa detecta anticuerpos unidos a los hematíes del paciente (sensibilización en el propio organismo), y es positiva en anemias hemolíticas autoinmunes, anemias hemolíticas inducidas por fármacos, hematíes fetales en la enfermedad hemolítica del recién nacido o hematíes transfundidos en reacciones transfusionales de naturaleza inmune.
Procedimiento de la Prueba antiglobulina directa
Se emplea para demostrar la absorción “in vivo” de IgG y/o fracciones del complemento en la superficie de los glóbulos rojos.
1) Preparar una suspensión de glóbulos rojos a probar en PBS al 3%.
2) En un tubo de hemólisis colocar 1 gota de esta suspensión.
3) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de remover la mayor cantidad posible de solución salina al final de cada lavado, de manera de obtener un botón celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante luego del último lavado.
4) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico) al botón de células.
Mezclar perfectamente y centrifugar durante 15 segundos a 1.000 g.
5) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón celular y observar macroscópicamente. La observación puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa.
Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas pueden dar lugar a lecturas negativas de un aglutinado débil (falso negativo).
6) Los resultados negativos deben confirmarse por adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles (Control de Coombs).
Coombs indirecta
La prueba de Coombs indirecta detecta anticuerpos libres en el suero del paciente (se provoca la sensibilización in vitro de hematíes y posteriormente se añade la antiglobulina).
Estos anticuerpos pueden surgir como consecuencia de la transfusión de sangre no compatible para el antígeno Rh (anticuerpos anti-D) u otros antígenos eritrocitarios, o cuando existe comunicación hemática materno-fetal durante la gestación o el parto cuando la madre es Rh — y el feto Rh+.
Procedimiento de la prueba antiglobulina indirecta (en solución fisiológica de baja fuerza iónica).
El empleo de esta solución permite reducir el tiempo de incubación a 15 minutos.
Los glóbulos rojos deben lavarse 2 veces con PBS y una vez con LISS.
Finalmente preparar con esta solución una suspensión de glóbulos rojos al 3%.
1) Colocar en un tubo de hemólisis 1 gota de suero a probar.
2) Agregar 1 gota de glóbulos rojos a probar al 3% en LISS.
3) Mezclar e incubar a 37°C durante 15 minutos en baño de agua.
4) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de remover la mayor cantidad posible de solución salina al final de cada lavado, de manera de obtener un botón celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante luego del último lavado.
5) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico) al botón de células. Mezclar perfectamente y centrifugar durante 15 segundos a 1.000 g.
6) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón celular y observar macroscópicamente. La observación puede si se emplea una fuente de luz difusa.
Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas pueden dar lugar a lecturas negativas de un aglutinado débil (falso negativo).
7) Los resultados negativos deben confirmarse por adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles (Control de Coombs).
Interpretación de los resultados
La observación de aglutinación (con cualquiera de las técnicas empleadas) en presencia del Suero Anti-humano (poliespecífico) indica la presencia de IgG o componentes del complemento en la membrana del glóbulo rojo; la reacción es positiva.
Si no se observa aglutinación, la reacción es negativa.
La prueba de Coombs directa detecta anticuerpos unidos a los hematíes del paciente (sensibilización en el propio organismo), y es positiva en anemias hemolíticas autoinmunes, anemias hemolíticas inducidas por fármacos, hematíes fetales en la enfermedad hemolítica del recién nacido o hematíes transfundidos en reacciones transfusionales de naturaleza inmune.
Procedimiento de la Prueba antiglobulina directa
Se emplea para demostrar la absorción “in vivo” de IgG y/o fracciones del complemento en la superficie de los glóbulos rojos.
1) Preparar una suspensión de glóbulos rojos a probar en PBS al 3%.
2) En un tubo de hemólisis colocar 1 gota de esta suspensión.
3) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de remover la mayor cantidad posible de solución salina al final de cada lavado, de manera de obtener un botón celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante luego del último lavado.
4) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico) al botón de células.
Mezclar perfectamente y centrifugar durante 15 segundos a 1.000 g.
5) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón celular y observar macroscópicamente. La observación puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa.
Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas pueden dar lugar a lecturas negativas de un aglutinado débil (falso negativo).
6) Los resultados negativos deben confirmarse por adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles (Control de Coombs).
Coombs indirecta
La prueba de Coombs indirecta detecta anticuerpos libres en el suero del paciente (se provoca la sensibilización in vitro de hematíes y posteriormente se añade la antiglobulina).
Estos anticuerpos pueden surgir como consecuencia de la transfusión de sangre no compatible para el antígeno Rh (anticuerpos anti-D) u otros antígenos eritrocitarios, o cuando existe comunicación hemática materno-fetal durante la gestación o el parto cuando la madre es Rh — y el feto Rh+.
Procedimiento de la prueba antiglobulina indirecta (en solución fisiológica de baja fuerza iónica).
El empleo de esta solución permite reducir el tiempo de incubación a 15 minutos.
Los glóbulos rojos deben lavarse 2 veces con PBS y una vez con LISS.
Finalmente preparar con esta solución una suspensión de glóbulos rojos al 3%.
1) Colocar en un tubo de hemólisis 1 gota de suero a probar.
2) Agregar 1 gota de glóbulos rojos a probar al 3% en LISS.
3) Mezclar e incubar a 37°C durante 15 minutos en baño de agua.
4) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de remover la mayor cantidad posible de solución salina al final de cada lavado, de manera de obtener un botón celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante luego del último lavado.
5) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico) al botón de células. Mezclar perfectamente y centrifugar durante 15 segundos a 1.000 g.
6) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón celular y observar macroscópicamente. La observación puede si se emplea una fuente de luz difusa.
Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas pueden dar lugar a lecturas negativas de un aglutinado débil (falso negativo).
7) Los resultados negativos deben confirmarse por adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles (Control de Coombs).
Interpretación de los resultados
La observación de aglutinación (con cualquiera de las técnicas empleadas) en presencia del Suero Anti-humano (poliespecífico) indica la presencia de IgG o componentes del complemento en la membrana del glóbulo rojo; la reacción es positiva.
Si no se observa aglutinación, la reacción es negativa.
*Buffer fosfato (PBS) pH 7,0 ± 0,2.
**Solución fisiológica de baja fuerza iónica (LISS).
La Clínica y el Laboratorio - Bacells, 22a edición
Inserto Wienner Lab.
lunes, 1 de mayo de 2017
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